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在肿瘤免疫治疗领域，受体酪氨酸激酶样孤儿受体1（ROR1）近年来备受关注。作为ROR受体家族的一员，ROR1在胚胎发育中扮演重要角色，而在正常成人组织中表达较少或不表达。然而，研究发现ROR1在多种恶性肿瘤中异常高表达，这使其成为肿瘤诊断和治疗的新靶点。本文将深入探讨ROR1的生物学特性、与肿瘤的关系以及其蛋白质表达水平在临床试验中的应用。
PART 01
ROR1的家族与功能：从胚胎发育到肿瘤发生
ROR1是一种I型跨膜蛋白，属于受体酪氨酸激酶样孤儿受体（ROR）家族。它由937个氨基酸组成，其胞外部分包含免疫球蛋白样结构域、卷曲蛋白结构域（FZD）和近膜Kringle结构域，FZD结构域参与Wnt通路信号传导，Kringle结构域有助于识别Wnt并结合大分子结构，进而驱动胞内酪氨酸激酶结构域传递细胞增殖信号[1]。ROR1最初是在1992年通过cDNA文库筛选发现的，因其在正常成人组织中表达受限且缺乏已知配体，被称为“孤儿受体” [2]。在胚胎发育过程中，ROR1参与调控神经元迁移、骨骼发育、心脏形成和细胞极性的建立。研究表明，ROR1通过激活Wnt5a信号通路调控细胞迁移和组织形态发生[3]。然而，胚胎发育完成后，ROR1表达显著下调，仅于部分正常组织中维持低水平表达。
图1 ROR1蛋白结构
PART 02
ROR1的表达特征：从正常组织到肿瘤异常
ROR1在正常成人组织中的表达具有高度选择性。根据人类蛋白质图谱（Human Protein Atlas）和相关研究数据，ROR1在大多数正常成人组织中表达水平极低或检测不到，例如在脑、心脏、肺和肝脏等重要器官中几乎不存在ROR1的表达[4]。然而，ROR1在某些特定正常组织中呈现明显的细胞表面染色[5,6]。例如，在甲状旁腺、胰岛细胞以及胃肠道的某些区域（如食管基底膜、胃窦和十二指肠粘膜）中，可以检测到ROR1的显著表达（图2A-B）。此外，脂肪组织和某些上皮细胞中也观察到低水平的ROR1表达。
图2 ROR1在正常组织中的表达
与正常组织相反，ROR1在多种恶性肿瘤中异常高表达，包括慢性淋巴细胞白血病（CLL）、套细胞淋巴瘤（MCL）、急性淋巴细胞白血病（ALL）、弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）等血液系统肿瘤，以及乳腺癌（尤其是三阴性乳腺癌）、肺癌、卵巢癌、结肠癌和黑色素瘤等实体肿瘤[7-9]（图3A-E）。研究表明，ROR1的高表达与肿瘤侵袭性、转移能力和不良预后密切相关[10]。这种在正常组织中低表达而在肿瘤中异常高表达的特性，使ROR1成为肿瘤诊断和治疗的理想靶点。基于ROR1在肿瘤中的特异性高表达特性，其临床转化潜力逐渐显现，尤其在预后评估与靶向治疗中备受关注。
图3 ROR1在肿瘤中的表达
PART 03
ROR1检测在临床试验中的应用：从血液肿瘤到实体瘤
ROR1作为肿瘤特异性靶点，在血液肿瘤和实体瘤的临床试验中展现出广阔的应用前景。在多项临床试验和回顾性研究中，ROR1的高表达与患者的总生存期（OS）缩短显著相关。例如，在弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）的研究中，通过免疫组化染色检测ROR1表达水平，发现ROR1高表达的患者OS显著低于ROR1低表达或阴性患者[11]。类似的结果也在非小细胞肺癌（NSCLC）和卵巢癌中得到验证，ROR1高表达与肿瘤的侵袭性、转移潜能及不良预后密切相关[12,13]。
这些研究结果表明，ROR1 IHC检测不仅能够为临床试验提供可靠的入组标准，还能够预测患者的OS和治疗反应，为个体化治疗方案的制定提供重要依据。
图4 ROR1 的高表达与肺腺癌患者的较短OS相关
PART 04
ROR1检测：判读方法与标准化
目前，常用的ROR1判读方法为H-score（组织化学评分）[8,9]。H-score是一种用于半定量评估免疫组化染色结果的方法，特别在肿瘤学研究中被广泛采用，它综合考虑了阳性细胞比例和着色强度，其计算公式为：H-score = (弱阳性肿瘤细胞比例 × 1) + (中等阳性肿瘤细胞比例 × 2) + (强阳性肿瘤细胞比例 × 3)，总分范围为0-300。
图5 多肿瘤TMA队列中的ROR1表达和H-score值
ROR1的免疫组化（IHC）染色在临床诊断和研究中具有重要意义，其染色特点主要表现为细胞膜和/或细胞质的特异性着色。ROR1的阳性表达通常呈现为清晰的膜染色，有时伴有细胞质染色，但单纯的细胞质染色需谨慎判读，以避免假阳性结果。在判读过程中，正常组织（如脂肪组织或胰腺）可作为内对照，确保染色质量。不同抗体的染色结果可能存在差异，建议使用经过严格验证的商业化抗体。熙宁生物已经利用相关抗体建立起ROR1的免疫组化检测方法，欢迎广大客户垂询。
正常胰腺组织 | 胰腺癌 |
非小细胞肺癌 | 套细胞淋巴瘤 |
图6 ROR1染色示意图（来自上海精翰生物IHC实验室）
PART 05
关于我们
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平台已成功完成超200种靶标的免疫组化方法开发，其中包括PD-L1、Claudin18.2、HER2、HER3、TROP-2、dMMR、TIM-3、MSLN、B7H3等备受关注的关键靶标，且多种方法已获得NordiQC、CAP、CCPI等国内外权威机构的高度认可。凭借卓越的服务品质和专业能力，熙宁生物生物病理平台已与100多家客户建立了长期稳定的合作关系，深度参与了超过200个涵盖临床前、临床1-3期的各类病理检测项目，在行业内树立了良好的口碑和卓越的品牌形象。
参考文献：
[1] Zhao Y, et al. Tyrosine Kinase ROR1 as a Target for Anti-Cancer Therapies. Front Oncol. 2021 May 28;11:680834.
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