SNP基因分型
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        实时荧光定量PCR(Q-PCR)技术,利用荧光信号的变化实时检测PCR扩增反应中每一个循环扩增产物量的变化,最终对起始模板进行精确的定量分析。在研究领域中,Q-PCR普遍应用于细胞中的基因拷贝数的测定。在加入一对扩增引物的同时再加入一个特异性的荧光探针。Taqman探针是一条寡核苷酸单链,与目标DNA互补,探针两端分别有一个报告基团和一个淬灭基团,探针完整的时候,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收,不会检测到荧光。PCR扩增时,Taq DNA聚合酶的5ˊ-3ˊ外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,报告基团释放并发出荧光。每合成一条DNA链,就会切断一条探针,并产生一个单位荧光信号,实现了荧光信号的积累与PCR产物形成完全同步。 荧光定量PCR(Q-PCR)检测具有灵敏度高,检测线性范围宽,检测精度和重复性好等突出优势,被公认为目前世界用于临床及科研的最推荐核酸分子诊断技术,被美国FDA承认并推崇。Q-PCR检测手段除了对CAR-T等细胞治疗进行PK研究外,临床上对可复制性逆转录病毒(RCR)/可复制性慢病毒(RCL)的潜在风险进行跟踪检测。在SNP基因分型这方面,可以更加深入了解药物作用机制。 

        SNP(单核苷酸多态性)基因分型技术原理是PCR扩增含有SNP的基因组片段,主要特点是准确性高、灵活性强、通量大,主要方法是TaqMan探针法。SNP是人类最普遍的遗传变异形式之一,指在基因组水平上由单个核苷酸变异引起的DNA序列多态性。其被普遍应用于疾病遗传学、药物基因组学及生物多样性分析中。




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